Описание
Набор реагентов «СПЕЦ-IgE-ИФА» предназначен для количественного определения концентрации аллерген-специфического IgE в cыворотке (плазме) крови методом твердофазного иммуноферментного анализа.
Специфические иммуноглобулины класса Е (sIgE) участвуют в развитии аллергии I (немедленного) типа, симптомы которой (сенной насморк, коньюктивит, крапивница, астма, анафилактический шок), проявляются, как правило, в течение 30 минут. Обнаружение аллерген-специфического IgE в сыворотке или плазме служит для диагностики аллергии I типа.
В состав Набора входят 6 базовых аллергенов:
- D1 — клещ домашней пыли;
- E1 — эпидермис кошки;
- E2 — эпидермис собаки;
- Gx — смесь пыльцы злаков;
- W56 — смесь пыльцы сорных трав;
- Tx — смесь пыльцы деревьев
Принцип работы набора Спец-IgE-ИФА:
- Определение аллерген-специфического IgE основано на использовании «сэндвич»-варианта твердофазного иммуноферментного анализа.
- На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к IgE.
- В лунках планшета, при добавлении исследуемого образца, происходит связывание IgE, содержащегося в исследуемом образце, с антителами на твердой фазе.
- Образовавшийся комплекс выявляют с помощью биотинилированного аллергена и конъюгата стрептавидина с пероксидазой хрена.
- В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу.
- Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание растворов в лунках.
- Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации аллерген-специфического IgE в исследуемом образце.
- Концентрацию аллерген-специфического IgE в исследуемых образцах по калибровочному графику зависимости оптической плотности от содержания аллерген-специфического IgE в калибровочных пробах.
Оборудование и материалы, необходимые для работы с набором:
- фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую плотность содержимого лунок планшета при длине волны 450 нм;
- орбитальный шейкер (встряхиватель) для микропланшет, скорость 600–800 об/мин;
- дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы в диапазоне 25–250 мкл;
- цилиндр мерный вместимостью 1000 мл;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые;
- бумага фильтровальная.
Характеристики набора Спец-IgE-ИФА
Схема проведения анализа | 60’ (18-25°C,шейкирование)/ 60’ (18-25°C,шейкирование)/ 30’ (18-25°C,шейкирование)/ 10-20’ (ТМБ) |
Аналитическая чувствительность, не менее | 0,05 МЕ/мл |
Сведения о калибровочных пробах и/или контрольных сыворотках | 5 (0-17,5 МЕ/мл), 1 контрольная сыворотка |
Объем (мкл) и тип исследуемого образца | 50 сыворотка (плазма) крови |
Количество определений | 96 |
Антитела к ВИЧ 1,2, вирусу гепатита С и HBsAg отсутствуют
Контрольные сыворотки, входящие в состав набора, инактивированы.
Спец-IgE-ИФА-Инструкция-по-применению
Спец-IgE-ИФА Регистрационное удостоверение