Описание
ИФА тест 5191OKA Okadaic Acid позволяет определить количество окадаиновой кислоты в морепродуктах. Принцип работы теста основан на антителах, направленных на выявление окадаиновой кислоты.
Области применения 5191OKA Okadaic Acid
Высокие концентрации токсинов могут накапливаться в морепродуктах, питающихся способом фильтрации воды, таких как моллюски, мидии и устрицы, Прием в пищу зараженных морепродуктов вызывает отравления у людей, которые характеризуются 4 симптомами:
- паралитическим отравлением моллюсками (PSP),
- нейротоксическим отравлением моллюсками (NSP),
- диарейным отравлением моллюсками (DSP)
- амнестическим отравлением моллюсками (ASP).
DSP в основном вызывается полиэфирным токсином окадаиновой кислотой (ОА) и несколькими аналогами ОА, среди которых динофизистоксины DTX1, DTX2 и DTX3. В
Регламент Европейского союза (ЕС) № 853/2004 предусматривает, что живые двустворчатые моллюски не должны содержать ОА в общем количестве (измеряемом во всем теле или любой части, съедобной отдельно), превышающем предел в 160 мкг, эквивалентов ОА (ОА, динофизистоксины и пектенотоксины вместе) на килограмм.
Метод определения окадеиновой кислоты с помощью ИФА теста
Набор для ИФА на основе пластин микротитра состоит из 12 полосок, каждая из которых содержит 8 лунок, предварительно покрытых овечьими антителами к IgG кролика.
Антитела (кроличьи поликлональные антитела к антиокадаиновой кислоте), пероксидаза хрена (HRP), меченная окадаиновой кислотой (ферментная конъюгированная окадаиновая кислота-HRP), а также стандартные растворы или образцы окадаиновой кислоты добавляются в предварительно покрытые лунки, после чего следует этап инкубации.
В процессе инкубации идет конкуренция между антителами, в которой образец конкурирует за связывание с антителом против окадаиновой кислоты.
После инкубации в течение 30 минут несвязанные реагенты удаляют на стадии промывки.
Количество связанной окадаиновой кислоты-HRP визуализируется добавлением субстрата/хромогена (H2O2/TMB; тетраметилбензидин). Бесцветный хромоген преобразуется ферментом (HRP) в синий продукт реакции. Чем больше окадаиновой кислоты присутствует в стандартном растворе или образце, тем меньше проявляется цвет.
Субстрат останавливают добавлением серной кислоты.
В кислой среде синий цвет меняется на желтый.
Полученная интенсивность цвета измеряется фотометрически при 450 нм. Исходя из интенсивности получают количественный результат окадеиновой кислоты в продукте.