Описание
Набор реагентов «свβХГ-ИФА» предназначен для количественного определения концентрации свободной β субъединицы ХГ в cыворотке (плазме) крови методом твердофазного иммуноферментного анализа.
Принцип работы набора:
- Определение свободной β субъединицы ХГ основано на использовании «сэндвич»-варианта твердофазного иммуноферментного анализа. На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к свободной β субъединице ХГ человека.
- В лунках планшета, при добавлении исследуемого образца, происходит связывание свβХГ, содержащегося в исследуемом образце, с антителами на твердой фазе.
- Образовавшийся комплекс выявляют с помощью конъюгата мышиных моноклональных антител к β субъединице ХГ человека с пероксидазой хрена. В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу.
- Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашиваниерастворов в лунках. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации свободной β субъединицы ХГ в исследуемом образце.
- Концентрацию свободной β субъединицы ХГ в исследуемых образцах определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности от содержания свободной β субъединицы ХГ в калибровочных пробах.
Аналитические параметры:
- Специфичность. Использование мышиных моноклональных антител к свободной β субъединице ХГ позволяет достичь высокой специфичности анализа.
- Воспроизводимость. Коэффициент вариации результатов определения содержания свβХГ в одном и том же образце cыворотки (плазмы) крови с использованием Набора «свβХГ-ИФА» не превышает 8.0%.
- Линейность. Зависимость концентрации свβХГ в образцах cыворотки (плазмы) крови при разведении их cывороткой (плазмой) крови, не содержащей свβХГ, имеет линейный характер в диапазоне концентраций 10–250 нг/мл и составляет ±10.0%.
- Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» – соответствие измеренной концентрации свβХГ предписанной, полученной путем смешивания равных объемов контрольной сыворотки и калибровочной пробы 50 нг/мл. Процент «открытия» составляет 90–110%.
- Чувствительность. Минимальная достоверно определяемая Набором «свβХГ-ИФА» концентрация свβХГ в cыворотке (плазме) крови не превышает 1.0 нг/мл.
Обрудование и материалы, необходимые при работе с набором:
- фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую плотность содержимого лунок планшета при длине волны 450 нм;
- термостат, поддерживающий температуру +37 °C ±0.1 °C;
- дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы в диапазоне 20–250 мкл;
- цилиндр мерный вместимостью 1000 мл;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые;
- бумага фильтровальная.
Характеристики набора свβХГ-ИФА
| Схема проведения анализа |
30′(37°C)/30′(37°C)/ 10-20′ (ТМБ) |
| Аналитическая чувствительность, не менее |
1,0 нг/мл |
| Сведения о калибровочных пробах и/или контрольных сыворотках |
5 (0-250 нг/мл), 1 контрольная сыворотка |
| Объем (мкл) и тип исследуемого образца |
20 сыворотка (плазма) крови |
| Количество определений |
96 |
свβХГ-ИФА Инструкция по применению
