Описание
Набор реагентов «Общий IgG-ИФА» предназначен для количественного определения концентрации общего IgG в биологических жидкостях (см. таблицу М) методом твердофазного иммуноферментного анализа.
Антитела класса IgG преобладают в составе фракции γ – глобулинов и являются основным классом антител, присутствующих в сыворотке крови человека.
Увеличение концентрации IgG в сыворотке крови является основным признаком зрелого иммунного ответа, а снижение их концентрации ниже 5 г/л свидетельствует о развитии тяжелого иммунодефицита. Определение концентрации IgG в сыворотке крови, как и соотношения содержания IgG/IgA/IgM может служить одним из основных критериев оценки иммунного статуса индивида и использоваться при контроле лечения некоторых инфекционных заболеваний. Резкое повышение концентрации IgG в сыворотке крови наблюдается при миеломной болезни.
Принцип работы набора Общий IgG-ИФА:
- Определение общего IgG основано на использовании «сэндвич»-варианта твердофазного иммуноферментного анализа.
- На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к общему IgG человека.
- В лунках планшета, при добавлении исследуемого образца, происходит связывание общего IgG, содержащегося в исследуемом образце, с антителами на твердой фазе.
- Образовавшийся комплекс выявляют с помощью конъюгата мышиных моноклональных антител к общему IgG с пероксидазой хрена.
- В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу.
- Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание растворов в лунках.
- Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации общего IgG в исследуемом образце. Концентрацию общего IgG в исследуемых образцах определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности от содержания общего IgG в калибровочных пробах.
Оборудование и материалы, необходимые для работы с набором:
- фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическуюплотность содержимого лунок планшета при длине волны 450 нм;
- термостат, поддерживающий температуру +37 °C ±0.1 °C;
- дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы в диапазоне 10–250 мкл;
- цилиндр мерный вместимостью 1000 мл;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые;
- бумага фильтровальная.
Характеристики набора Общий IgG-ИФА
Схема проведения анализа | 30′(37°C)/30′(37°C)/ 10-20′ (ТМБ) |
Аналитическая чувствительность, не менее (или иные технические характеристики) |
0,06 г/л |
Сведения о калибровочных пробах и/или контрольных сыворотках | 5 (0-25 г/л), 1 контрольная сыворотка |
Объем (мкл) и тип исследуемого образца | 10 — сыворотка (плазма) крови,слюна, СМЖ; 50 — моча |
Количество определений | 96 |
Антитела к ВИЧ 1,2, вирусу гепатита С и HBsAg отсутствуют
Контрольные сыворотки, входящие в состав набора, инактивированы