Описание
Набор реагентов «Общий IgE-ИФА» предназначен для количественного определения концентрации общего иммуноглобулина класса E (IgE) в cыворотке (плазме) крови методом твердофазного иммуноферментного анализа.
Общий иммуноглобулин Е (IgE) считается лабораторным маркером атопических заболеваний (атопической астмы, дерматита и риноконъюнктивита).
Атопический (IgE-зависимый) механизм может также лежать в основе гастроэнтероколита, крапивницы, других форм васкулитов (в том числе системных), холецистита, вульвовагинита и цистита. Часть лекарственной аллергии (преимущественно на пенициллины и белковые препараты) также развивается по IgE-зависимому механизму.
При всех вышеперечисленных состояниях выработка высоких титров специфических антител класса IgE может приводить к повышению уровня общего IgE в сыворотке. Особенно высокий уровень общего IgE характерен для атопического дерматита. Кроме атопических заболеваний, общий IgE сыворотки крови значительно повышается при паразитарных инвазиях и микозах (особенно системных), редко – при системных аутоиммунных заболеваниях и иммунодефицитных состояниях (особенно при гипер-IgE синдроме), а также при мастоцитозе (опухоли из тучных клеток) и чрезвычайно редкой IgE-миеломе.
Снижение уровня общего IgE в сыворотке (ниже 15 МЕ/мл у взрослых) – явление редкое и малоизученное, описано при гипогаммаглобулинемиях, некоторых аутоиммунных заболеваниях, язвенном колите и первичном билиарном циррозе.
Принцип работы набора Общий IgE-ИФА:
- Определение общего иммуноглобулина класса E (IgE) основано на использовании «сэндвич»-варианта твердофазного иммуноферментного анализа.
- На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к общему IgE человека. В лунках планшета, при добавлении исследуемого образца, происходит связывание общего IgE, содержащегося в исследуемом образце, с антителами на твердой фазе.
- Образовавшийся комплекс выявляют с помощью конъюгата кроличьих поликлональных антител к IgE человека с пероксидазой хрена.
- В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу.
- Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание растворов в лунках.
- Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации общего иммуноглобулина класса E (IgE) в исследуемом образце.
- Концентрацию общего иммуноглобулина класса E (IgE) в исследуемых образцах определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности от содержания общего иммуноглобулина класса E (IgE) в калибровочных пробах.
Оборудование и материалы, необходимые для работы с набором:
- фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую плотность содержимого лунок планшета при длине волны 450 нм;
- термостат, поддерживающий температуру +37 °C ±0.1 °C;
- дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы в диапазоне 25–250 мкл;
- цилиндр мерный вместимостью 1000 мл;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые;
- бумага фильтровальная.
Характеристики набора Общий IgE-ИФА
Схема проведения анализа | 30′(37°C)/30′(37°C)/10-20′ (ТМБ) |
Аналитическая чувствительность, не менее | 3,0 МЕ/мл |
Сведения о калибровочных пробах и/или контрольных сыворотках | 5 (0-1000 МЕ/мл), 1 контрольная сыворотка |
Объем (мкл) и тип исследуемого образца | 50 сыворотка (плазма) крови |
Количество определений | 96 |
Общий-IgE-ИФА-Инструкция-по-применению
Общий IgE-ИФА Регистрационное удостоверение