Описание
Набор реагентов «IgG2-ИФА» предназначен для количественного определения концентрации IgG2 в cыворотке крови методом твердофазного иммуноферментного анализа.
Среди антител класса IgG человека на основании различий в аминокислотной последовательности тяжелых цепей выделяют четыре подкласса – IgG1, IgG2, IgG3, IgG4.
Подкласс IgG2 играет существенную роль в иммунном ответе на полисахаридные антигены инкапсулированных бактерий. Избирательный дефицит IgG2 характеризуется пониженным содержанием IgG2 в сыворотке и сопровождается ослаблением иммунного ответа при инфицировании менингококками, пневмококками, гемофильной палочкой и другими патогенами.
В результате повышается риск развития хронических инфекционных заболеваний верхних и нижних дыхательных путей, неэффективными оказываются стандартные схемы лечения и вакцинация полисахаридными антигенами. Снижение содержания IgG2 наблюдают также в большинстве случаев общего вариабельного иммунодефицита.
Содержание IgG2 в сыворотке крови человека составляет около 20% от общего уровня IgG. Концентрация IgG2, будучи одним из показателей иммунного статуса индивида, является параметром, который принимают во внимание при диагностике, прогнозе развития ряда заболеваний и контроле эффективности лечения.
Принцип работы набора IgG2-ИФА:
- Определение IgG2 основано на использовании «сэндвич»-варианта твердофазного иммуноферментного анализа.
- На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к IgG2 человека.
- В лунках планшета, при добавлении исследуемого образца, происходит связывание IgG2, содержащегося в исследуемом образце, с антителами на твердой фазе.
- Образовавшийся комплекс выявляют с помощью конъюгата мышиных моноклональных антител к IgG2 с пероксидазой хрена.
- В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу.
- Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание растворов в лунках.
- Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации IgG2 в исследуемом образце.
- Концентрацию IgG2 в исследуемых образцах определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности от содержания IgG2 в калибровочных пробах.
Оборудование и материалы, необходимые для работы с набором:
- фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую плотность содержимого лунок планшета при длине волны 450 нм;
- термостат, поддерживающий температуру +37 °C ±0.1 °C;
- дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы в диапазоне 25–250 мкл;
- цилиндр мерный вместимостью 1000 мл;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые;
- бумага фильтровальная.
Характеристики набора IgG2-ИФА
Схема проведения анализа | 30′(37°C)/30′(37°C)/ 10-20′ (ТМБ) |
Аналитическая чувствительность, не менее (или иные технические характеристики) |
0,06 г/л |
Сведения о калибровочных пробах и/или контрольных сыворотках | 6 (0-15 г/л), 1 контрольная сыворотка |
Объем (мкл) и тип исследуемого образца | 10 — сыворотка (плазма) крови |
Количество определений | 96 |
IgG2-ИФА Инструкция по применению