Описание
Набор реагентов ИФА-nAb-SARS-CoV-2/1 предназначен для полуколичественного определения в сыворотке или плазме крови человека антител, обладающих вирус-нейтрализующей активностью, на основании оценки ингибирования связывания RBD с ACE2-рецептором. Уровень IgG к различным белкам (в том числе и RBD) вируса SARS-CoV-2 не всегда коррелирует с их способностью препятствовать проникновению вирусных частиц в клетки и развитию коронавирусной инфекции. Среди всех антител, вырабатывающихся в результате перенесенной инфекции или в ответ на введение вакцины, только часть обладает вируснейтрализующей активностью (т.е. защищает организм от заражения SARS-CoV-2).
Применение ИФА-nAb-SARS-CoV-2/1
Определение именно нейтрализующих антител очень важно как при проверке эффективности иммунизации всеми типами вакцин, так и при определении напряженности постинфекционного иммунитета, и позволяет оценивать риск повторного заражения с высокой долей достоверности.
Использование набора ИФА-nAb-SARS-CoV-2/1 для определения нейтрализующих антител является более быстрым и простым, по сравнению с классическим методами нейтрализации вируса в культуре клеток.
Принцип метода использования ИФА-nAb-SARS-CoV-2/1.
Принцип работы набора основан на конкурентном ИФА-анализе. Во время инкубации биотинилированный АСЕ2 связывается с RBD-участком, иммобилизованным в лунках микропланшета. Если в исследуемом, образце присутствуют нейтрализующие антитела, они ингибируют связывание АСЕ2 с RBD-фрагментом. Связавшийся ACE2-биотин выявляют с помощью конъюгата стрептавидина с пероксидазой хрена. После проведения инкубации с субстратом и внесения стоп-реагента, измеряется оптическая плотность раствора. Измеренная оптическая плотность находится в обратной зависимости от количества нейтрализующих антител к вирусу SARS-CoV-2 в контрольных и исследуемых образцах.
Состав набора реагентов ИФА-nAb-SARS-CoV-2/1:
Данный набор рассчитан на проведение 96 исследований.
- Иммуносорбент – 1 шт;
- Концентрат ACE2-биотина (100Х концентрат) – 0,065 мл x 1 флакон;
- Буфер для разведения ACE2-биотина – 6,5 мл x 1 флакон;
- Коньюгат – 11 мл x 1 флакон;
- Положительный контроль – 0,3 мл x 1 шт;
- Отрицательный контроль – 1 мл x 1 шт;
- Раствор для разведения сывороток – 15 мл x 1 шт;
- 20-ти кратный концентрат промывочного раствора * – 30 мл x 1 шт;
- ТМБ-субстрат * – 12 мл x 1 шт;
- Стоп-реагент * – 12 мл x 1 шт;
- Планшет для разведения образцов – 1 шт;
- Пленки для заклеивания планшета – 2 шт;
- Наконечники полимерные одноразовые – 24 шт;
- Ванночки для многоканальных дозаторов – 2 шт.
* Компоненты набора реагентов являются взаимозаменяемыми в пределах их срока хранения при условии совпадения их номера серии.
Условия хранения 2-8 ℃, транспортировка при 2-8 ℃ (8-26 ℃ <5 сут.), срок годности 12 мес.
ИФА-исследование: общая информация
ИФА-тест (иммуноферментный анализ) — это лабораторный метод, используемый для выявления и количественного определения антител, антигенов и других биомолекул в образцах, таких как кровь, сыворотка или плазма. Этот метод основан на использовании антигенов и антител, которые специфически связываются друг с другом, что позволяет определить наличие и уровень определенных веществ.
Принципы и этапы ИФА:
1. Подготовка образца: Образцы пациента (например, кровь) обрабатываются для получения сыворотки.
2. Иммобилизация антигена: Антиген, к которому будет производиться реакция, фиксируется на поверхности пластины.
3. Добавление образца: Сыворотка (или другой пробный материал) добавляется к пластине. Если в образце есть антитела, они свяжутся с антигеном.
4. Добавление вторичного антитела: К образцам добавляется вторичное антитело, которое связано с ферментом и способно связываться с антителами пациента.
5. Субстрат для фермента: Добавляется субстрат, который реагирует с ферментом, высвобождая сигнал (например, цвет), который можно измерить.
6. Считывание результатов: Измеряется интенсивность сигнала, что позволяет количественно определить концентрацию исследуемого вещества.
Применение ИФА:
— Диагностика инфекционных заболеваний: Например, ВИЧ, гепатиты, сифилис и другие.
— Определение аллергий: Выявление специфических IgE-антител.
— Контроль состояния заболеваний: Например, уровень гормонов, определение маркеров опухолей.
ИФА-тесты отличает высокая чувствительность и специфичность, что делает их важными инструментами в современной диагностике.