Описание
Набор реагентов «АПФ-ИФА» предназначен для количественного определения концентрации альфа-фетопротеина в cыворотке и плазме крови методом твердофазного иммуноферментного анализа.
Альфа-фетопротеин (АФП) – гликопротеин с молекулярной массой около 65 кДа, секретирующийся плодной печенью и желточным мешком. АФП является основным белком плодной сыворотки, у взрослых содержание АФП в сыворотке крови незначительно.
Определение АФП в сыворотке крови используется для первичной диагностики и мониторинга гепатоцеллюлярного рака печени, эмбриональноклеточных опухолей яичников и яичек, тератом и тератокарцином любой локализации. Определение АФП в сыворотке крови беременных женщин или в амниотической жидкости в период с 15 до 20 недели служит одним из лабораторных методов выявления тяжелой врожденной патологии плода – синдрома Дауна и дефектов нервной трубки.
Принцип работы набора АПФ-ИФА:
- Определение альфа-фетопротеина основано на использовании «сэндвич»- варианта твердофазного иммуноферментного анализа.
- На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к АФП человека.
- В лунках планшета, при добавлении исследуемого образца, происходит связывание АФП, содержащегося в исследуемом образце, с антителами на твердой фазе.
- Образовавшийся комплекс выявляют с помощью конъюгата мышиных моноклональных антител к АФП человека с пероксидазой хрена.
- В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу.
- Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание растворов в лунках.
- Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации альфа-фетопротеина в исследуемом образце.
- Концентрацию альфа-фетопротеина в исследуемых образцах определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности от содержания альфа-фетопротеина в калибровочных пробах.
Оборудование и материалы, необходимые для работы с набором:
- фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую плотность содержимого лунок планшета при длине волны 450 нм;
- термостат, поддерживающий температуру +37 °C ±0.1 °C;
- дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы в диапазоне 25–250 мкл;
- цилиндр мерный вместимостью 1000 мл;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые;
- бумага фильтровальная.
Характеристики набора АПФ-ИФА
Схема проведения анализа | А 60′(37°C)/10-20′ (ТМБ) |
Аналитическая чувствительность, не менее | 0,9 МЕ/мл |
Сведения о калибровочных пробах и/или контрольных сыворотках | 6 (0-500 МЕ/мл), 1 контрольная сыворотка |
Объем (мкл) и тип исследуемого образца | 50 сыворотка (плазма) крови |
Количество определений | 96 |
АФП-ИФА-Инструкция-по-применению
АФП-ИФА Регистрационное удостоверение